น้ำเกลือเป็นเรื่องปกติเมื่อเราพูดถึงชีววิทยาของเซลล์หรือชีวเคมี ส่วนใหญ่ในระหว่างการทดลองจำเป็นต้องใช้น้ำเกลือ น้ำเกลือทั่วไปสองชนิดคือ PBS และ HBSS มีส่วนผสมและสารเคมีบางอย่างที่ใช้เพื่อให้ได้มา แม้ว่าทั้งสองจะวางอยู่ในจานเพาะเชื้อที่มีเซลล์ แต่ก็ยังมีความแตกต่างกัน
PBS กับ HBSS
ความแตกต่างระหว่าง PBS และ HBSS คือน้ำเกลือ PBS ใช้ในการทดลองทางชีวเคมีและอณูชีววิทยา ในขณะที่ HBSS ใช้ในการวิจัยทางชีววิทยาโดยรวม แม้ว่าทั้งสองจะเป็นน้ำเกลือและช่วยรักษาค่า pH ที่เป็นกลาง แต่ก็ทำมาจากส่วนผสมที่แตกต่างกัน
PBS ย่อมาจาก Phosphate Buffered Saline เป็นสารละลายบัฟเฟอร์เกลือแบบน้ำซึ่งช่วยรักษาระดับ pH ให้คงที่ในตัวอย่าง ระดับ pH ของสารละลายนี้อยู่ที่ประมาณ 7.4 PBS มีลักษณะเป็นไอโซโทนิกและไม่เป็นพิษต่อเซลล์ส่วนใหญ่
HBSS ย่อมาจาก Hank's Balanced Salt Solution เป็นสารละลายของเหลวหรือผงที่ใช้เพื่อรักษาระดับ osmolality และ pH ในการใช้งานทางชีววิทยา พวกเขายังมีหน้าที่รับผิดชอบในการบำรุงรักษาเซลล์นอกตัวกลางการเจริญเติบโตในระยะสั้น HBSS ประกอบด้วยอิเล็กโทรไลต์หลายชนิดซึ่งพบได้ในช่องภายในเซลล์และนอกเซลล์
ตารางเปรียบเทียบระหว่าง PBS และ HBSS
| พารามิเตอร์ของการเปรียบเทียบ | พีบีเอส | HBSS |
| หมายถึง | น้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต | สารละลายเกลือที่สมดุลของแฮงค์ |
| วัตถุดิบ | NaCl, KCl, นา2HPO4, KH2ป4. | เกลืออนินทรีย์ กลูโคสหรือไพรูเวต ฟีนอลเรด และโซเดียมไบคาร์บอเนต |
| แบบฟอร์ม | ทำในรูปของเหลวเท่านั้น | ทำได้ทั้งแบบน้ำและแบบผง |
| อุณหภูมิในการจัดเก็บ | 15-30 องศาเซลเซียส | 4-8 องศาเซลเซียส |
| แอปพลิเคชั่น | ล้างเซลล์ ลำเลียงเนื้อเยื่อ เซลล์เจือจาง และเตรียมรีเอเจนต์ | การเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม สื่อการขนส่ง |
PBS คืออะไร?
PBS ย่อมาจาก Phosphate Buffered Saline เป็นสารละลายบัฟเฟอร์เกลือแบบน้ำซึ่งช่วยรักษาระดับ pH ให้คงที่ในตัวอย่าง ระดับน้ำและความเข้มข้นของไอออนของสารละลาย PBS ตรงกับร่างกายมนุษย์ ซึ่งหมายความว่าสารละลาย PBS มีลักษณะเป็นไอโซโทนิก
เนื่องจากสารละลาย PBS ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ จึงมีการใช้งานหลายอย่างรวมถึงการเจือจางสารและการปลดปล่อยเซลล์ที่จับเป็นก้อน เป็นต้น ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา สารละลาย PBS มีความต้องการสูงเนื่องจากถูกใช้เป็นทางเลือกแทนสื่อในการขนส่งไวรัสสำหรับการจัดเก็บ RNA ไวรัสรวมทั้ง SARS-CoV-2 หรือ Corona Virus
โซลูชัน PBS สามารถทำได้หลายวิธี ถ้าบัฟเฟอร์ถูกใช้บนเนื้อเยื่อที่มีชีวิต การเตรียมจำเป็นต้องใช้โพแทสเซียมคลอไรด์หรือแมกนีเซียมคลอไรด์ ในขณะที่ถ้าบัฟเฟอร์ถูกใช้บนเนื้อเยื่อที่ตายตัวก็ไม่จำเป็นต้องใช้โพแทสเซียมคลอไรด์หรือแมกนีเซียมคลอไรด์ ขณะเตรียม สามารถปรับระดับ pH ได้โดยใช้กรดไฮโดรคลอริกหรือโซเดียมไฮดรอกไซด์
ส่วนผสมที่พบบ่อยที่สุดของสารละลาย PBS ได้แก่ NaCl, KCl, Na2HPO4, และ KH2ป4 ในปริมาณที่คำนวณได้อย่างแม่นยำ สารละลาย PBS ยังสามารถเตรียมได้โดยการใช้ยาเม็ดหรือแคปซูลบัฟเฟอร์ PBS ที่ผลิตในเชิงพาณิชย์ สารละลาย PBS ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องหรือในตู้เย็น
HBSS คืออะไร?
HBSS ย่อมาจาก Hank's Balanced Salt Solution สารละลายนี้ตั้งชื่อตามนักชีววิทยา John H. Hanks ซึ่งกำหนดสูตรไว้ในปี 1940 สารละลายนี้ใช้เป็นระบบบัฟเฟอร์ในการเพาะเลี้ยงเซลล์และช่วยในการรักษาระดับ pH ที่เหมาะสมหรือการเติบโตของเซลล์ ค่า pH ที่เหมาะสมมีตั้งแต่ 7.0 ถึง 7.4
เนื่องจากสารละลาย HBBS มีกลูโคสและโซเดียมไบคาร์บอเนต จึงถูกใช้สำหรับการบำรุงรักษาเซลล์ระยะสั้นนอกอาหารเลี้ยงเชื้อ สารละลายเหล่านี้ยังใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่หลากหลาย เช่น การล้างเซลล์ การขนส่งเซลล์ หรือเซลล์ที่ทำให้เจือจาง สารละลาย HBSS ที่สร้างด้วยแคลเซียมและแมกนีเซียมใช้เป็นสื่อในการขนส่งหรือสำหรับการเตรียมรีเอเจนต์
สารละลาย HBSS ถูกเตรียมจากอาหารที่เป็นผงผสมกับน้ำเนื้อเยื่อเกรดเพาะเลี้ยง ส่วนผสมทั่วไปของสารละลาย HBSS คือเกลืออนินทรีย์ กลูโคสหรือไพรูเวต ฟีนอลเรด และโซเดียมไบคาร์บอเนต หลังจากการเตรียมการ ตัวอย่างของสารละลาย HBSS จะได้รับการทดสอบเพื่อยืนยันว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรียหรือเชื้อรา
สารละลาย HBSS มีความละเอียดอ่อนและบรรจุในขวดปลอดเชื้อที่ผ่านการฉายรังสีแกมมา สารละลาย HBSS ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำ 4-8 องศาเซลเซียส และให้ห่างจากแสงโดยตรง นอกจากนี้ยังมีอันตรายมากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับโซลูชัน PBS เนื่องจากเซลล์ของมนุษย์มีวัสดุที่เป็นอันตรายทางชีวภาพ
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง PBS และ HBSS
บทสรุป
ทั้ง PBS และ HBSS เป็นสารละลายน้ำเกลือที่ใช้เป็นหลักในด้านอณูชีววิทยา การทดลองทางชีวเคมี และการวิจัยด้านยาชีวภาพ ขณะทำการทดลอง สารละลายทั้งสองจะวางอยู่ในจานเพาะเชื้อที่มีเซลล์หรือเนื้อเยื่อ สารละลายจับเซลล์ไว้ขณะตรวจหรือใช้ในระหว่างการทดลอง แม้ว่าทั้งสองจะเป็นน้ำเกลือที่แยกจากกัน แต่ก็สามารถใช้แทนกันได้ภายใต้สภาวะที่เอื้ออำนวย อย่างไรก็ตาม ในกรณีดังกล่าว หากจำเป็นต้องใช้ตัวอย่างในรูปแบบผง สารละลาย HBSS จะถูกเลือกเนื่องจากสารละลาย PBS จะอยู่ในรูปของเหลวเท่านั้น
ส่วนใหญ่จะนิยมเตรียม PBS ในห้องปฏิบัติการ เนื่องจากองค์ประกอบของส่วนผสมสามารถเปลี่ยนแปลงได้หากจำเป็น และยังปลอดภัยที่จะทำเช่นนั้นเนื่องจากสารละลาย PBS ไม่ส่งผลเสียต่อเซลล์ ในทางกลับกัน สารละลาย HBSS เป็นที่ต้องการโดยตรงจากตลาด เนื่องจากเป็นอันตรายในการเตรียมในห้องปฏิบัติการโดยพิจารณาจากความบอบบางและการปนเปื้อนจากแบคทีเรียหรือเชื้อรา นอกจากนี้ การบรรลุสภาวะที่เอื้ออำนวยต้องใช้ทรัพยากรมากขึ้น เนื่องจากสามารถจัดเก็บได้ที่อุณหภูมิต่ำเท่านั้น
แม้ว่าจุดประสงค์พื้นฐานของสารละลายน้ำเกลือทั้งสองนี้จะเหมือนกัน แต่ความต้องการของ PBS ก็เพิ่มขึ้นในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา เนื่องจากสามารถใช้เป็นสื่อกลางในการขนส่งไวรัสสำหรับการจัดเก็บไวรัสอาร์เอ็นเอรวมถึงไวรัสโคโรน่า
